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[PACES] Plasmide et enzymes de restriction

Pseudo supprimé
Pseudo supprimé 19 décembre 2014 à 11:23:51

Bonjour, je viens à vous car je ne parviens pas à comprendre comment déterminer les enzymes de restrictions permettant de fixer l'ADNc sur le plasmide

Le sujet est le suivant:
http://puu.sh/dATka/1622daae13.png
http://puu.sh/dATlR/35f859ff32.png

La correction est la suivante:
http://puu.sh/dATp2/666593cd60.jpg

Mais je ne comprends pas pourquoi SalI et XhoI permettent l'insertion en 5' et XhoI et Kpn en 3' ?

Merci d'avance pour vos réponses ! :)

Pseudo supprimé
Pseudo supprimé 20 décembre 2014 à 15:49:42

Personne ne peut m'aider ? :c

Viouthay
Viouthay
Niveau 10
21 décembre 2014 à 00:35:33

En 5', GENE commence par une extrémité sortante 5' en TCGA. Il faut donc une enzyme capable de laisser une extrémité 5' sortante complémentaire sur le plasmide, soit AGCT. C'est exactement ce que SalI et XhoI permettent de faire, comme l'indique le schéma de la correction. Ces sites sont présents dans le MCS, donc c'est bon.

Pour le 3' ce sont tout simplement les sites qui figurent en 3' de GENE... sauf PvuII mais la correction t'explique déjà pourquoi on ne peut pas l'utiliser.

Cela dit c'est vraiment de la PACES ce truc ? Oo

Pseudo supprimé
Pseudo supprimé 21 décembre 2014 à 09:28:49

Ah oui d'accord, je pensais que c'était un peu plus poussé que ça, merci de ta réponse en tout cas !

Ouaip', ça rentre dans la partie "biologie moléculaire". :o))

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