Sorti le 9 mars 2011 sur PS3 et 360 (inclus d'office dans la version PC d'Assassin's Creed Brotherhood).

Leonardo a disparu, son jeune disciple, Salai, enjoint à Ezio de retrouver son maître. Notre assassin effectue alors une enquête qui le pousse à récupérer des tableaux volés, indiquant probablement l'endroit où le génie est retenu prisonnier. Ce DLC est très diversifié. Il y sera notamment question d'infiltrer une grosse propriété, un retour au château Saint-Ange, un nouveau tombeau et quelques énigmes sympathiques. En plus d'ajouter une mission relativement longue, le DLC adjoint aussi du contenu pour le multijoueur (une carte, quatre personnages et deux modes de jeu). De quoi passer de bons moments.